产品货号：
JN5089
中文名称：
热敏型UDG酶(无甘油)
英文名称：
Heat-labile Uracil-DNA Glycosylase(Glycerol-Free)
产品规格：
100U|500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧啶，产生的缺嘧啶位点，在高温或高pH下，极易水解断裂。热敏UDG酶与常规UDG酶相比，可在较低温度（20℃）下起作用，且对温度敏感、易于灭活，避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。升高温度和pH都会影响其水解活性。该产品对高温敏感，50℃以上就可以将酶完全失活。本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分，可用于冻干反应体系的配制和产品设计。
- 去除PCR残存污染；
- 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基，5～10min降解含dU的DNA模板；
- 适用于30℃反应，50℃灭活，尤其适合反转录一步法防污染扩增。
| 组分 | 100U | 500U |
| 热敏型UDG酶(无甘油，1U/μL) | 100μL | 500μL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
在25℃温度下，反应5min完全降解100ng含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；无核酸内、外切酶污染。
- Heat-labile UDG酶可在20～37℃均有很好的活性；50℃放置5～10min或95℃放置2min可使酶发生不可逆失活；
- 1U的Heat-labile UDG酶在30min内可消化1μg dU-DNA；
- 50μL反应体系合适的Heat-labile UDG酶用量在0.2～1μL范围内；反应时间在2～10min范围内；
- Heat-labile UDG酶在多种常用的PCR缓冲液中都表现很高的活性，可用于(q)PCR/(q)RT-PCR防污染反应；
- Heat-labile UDG酶对RNA以及不含尿嘧啶的DNA不具有活性；
- 由于Heat-labile UDG酶没有金属离子的要求，在EDTA存在下依然具有活性。
- 热失活：50℃加热10min或者95℃加热2min。
- 常用反应体系：
成分 用量 10×Reaction Buffer with Mg2+ 5μL 上游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 下游引物 0.2～1.0μM（终浓度） dATP/dGTP/dCTP 0.2mM（终浓度） dUTP 0.2～0.4mM（终浓度） Taq DNA Polymerase 1.25U Heat-labile UDG(1U/μL) 0.2～1μL 模板 ＜1μg ddH2O 至50μL - 常用PCR反应程序：
反应阶段 温度 循环数 时间 消化 25℃ 1 10min 预变性 95℃ 1 2min 变性 94℃ 30-35 20s 退火/延伸 50～60℃ 1kb/60s 终延伸 72℃ 1 5min 保温 4℃ 1 -
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